肠杆菌科药敏培养板

【用途】
主要用于微生物感染患者的血液、脑脊液和尿液等样本中分离得到的肠杆菌科细菌的快速药物敏感性试验。其它非肠杆菌科细菌也部分适合本产品。
本试剂盒中的药物及浓度根据NCCLS文件设定，通常用于常规治疗的首选。

【原理】
肠杆菌科细菌发酵培养基中的葡萄糖，产生的酸使pH值下降，从而在指示剂作用下，培养基由原先的红色变为黄色。
产品的实验操作是在一块反应板条的20个反应孔中进行的，见下表：
孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
药物 对照 氨苄西林 氨苄西林 哌拉西林 阿莫西林/克拉维酸 头孢噻吩 头孢噻吩 头孢孟多 头孢吡肟 头孢美唑
浓度µg/ml 8 16 16 8/4 8 16 8 8 16
孔号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
药物 头孢噻肟 头孢克罗 美洛培南 庆大霉素 庆大霉素 阿米卡星 四环素 环丙沙星 氧氟沙星 复合磺胺
浓度µg/ml 8 8 4 4 8 16 4 1 2 2/38


【规格】
12人份/盒

【试剂成分】
M.H培养基、葡萄糖、指示剂、NaCl及各类抗生素等。

【试剂盒组成】
检测板条 12人份
药敏培养基 12瓶，2.5ml/瓶
细菌稀释液 12瓶，2ml/瓶
比浊瓶 1瓶，2ml/瓶
说明书 1份

【操作方法】
1. 试剂瓶外观：药敏培养基为澄清的红色液体，稀释液为透明无色液体，如果出现浑浊，则表明受到污染，弃用。
2. 样本采集：取平板上生长的单个菌落或培养的菌液，适合两种情况：
l 已初步鉴定为肠杆菌科的细菌。
l 短时间内不能鉴定或时间紧急，可革兰氏染色镜检，如为单一的杆菌可使用本试剂盒。
3. 用接种环挑取菌落，在稀释瓶瓶壁上研磨，尽量使细菌均匀分散于液体中；也可直接取菌悬液在稀释瓶中混匀。
4. 将稀释瓶和比浊瓶比较，尽量使两者浑浊度一致。
5. 取稀释瓶中菌液100µl，加入药敏培养基中，充分混匀。
6. 撕开板条上的胶带，每孔加入100µl含菌的药敏培养基。
7. 每孔滴加一滴无菌石蜡油，封上胶带，35℃培养。

【结果观察】
1、 培养基颜色变为黄色或橙黄色，则为阳性，反之为阴性。
2、 培养4小时后观察结果，如果对照孔阴性则继续培养，直至对照孔变为黄色。
3、 培养时间不能超过20小时，超过此培养时间，结果不可信。
4、 如果培养16～20小时后各孔依旧不变色，但对照孔培养基已浑浊，则表明测试菌为非肠杆菌科，此时可采用两种措施：
4.1换适合非肠杆菌科的药敏板条进行重新实验。
4.2根据NCCLS方法，部分药敏结果对非肠杆菌科同样适合，这些药物为：
哌拉西林、头孢吡肟、头孢噻肟、美洛培南、庆大霉素、阿米卡星、四环素、氧氟沙星、环丙沙星、复合磺胺。
注：此时判别阳性的标准为对照孔浑浊，药敏孔澄清。

【注意事项】
1、 各试剂瓶为无菌产品，开启后应尽快使用，不可再长期存放。
2、 本产品操作应无菌操作，否则可能影响结果。
3、 培养基中的菌液应混合均匀，避免出现不合理的药敏结果，如果出现高浓度孔阳性，低浓度孔阴性的结果，则弃用该种药物。
4、 使用过的试剂瓶及板条灭菌处理后方可丢弃。

【储存及有效期】
本产品在2～8℃保存，保质期为12个月。