pfu DNA Polymerase

pfu DNA 聚合酶

产品简介

Pfu DNA Polymerase是最常用的高保真DNA聚合酶之一，来源于嗜热古菌Pyrococcus furiosus，可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Pfu DNA聚合酶有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity)，因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降。

产品特点

灵敏度高、特异性强、稳定性好

贮存条件

冰袋运输，-20℃长期保存

应用范围

高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、双平端PCR克隆等。

注意事项

1.由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用Pfu酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

2.Pfu DNA polymerase在扩增DNA片断时的出错率非常低，但其扩增效率也比较低。对于出错率要求不高的情况，例如RT-PCR进行定量或半定量，推荐使用Taq DNA polymerase。在扩增效率和出错率需要兼顾的情况，可以选择Taq DNA polymerase。在扩增2kb以下DNA片断时，Pfu酶和Taq酶的扩增效率相近。在准确性要求很高的情况下，须选择Pfu酶。

3.Pfu酶有3'至5'的外切酶活性，在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此Pfu酶一定要最后加入，并且要在冰浴上操作。

4.不能使用Taq DNA聚合酶的Buffer来替代Pfu DNA聚合酶的Buffer。

实验例

图 MYBiotech Taq DNA聚合酶与其他公司PCR扩增实验对比图