tRFs&tiRNAs是一类由tRNA发生精确切割而产生的非编码小RNA分子。近来研究表明，这类小RNA分子具有多种生物学功能，比如作为microRNA参与RNA干扰；调节靶向mRNA的稳定性；在细胞应激条件下促进应激颗粒(SG)的组装；以及调控细胞凋亡等。

      此外，tRFs&tiRNAs还与癌症、神经退行性疾病等多种疾病紧密关联。由于其独特的前体与切割方式，tRFs&tiRNAs携带有多种内部或末端修饰。比如，其前体tRNA上存在大量的转录后修饰，而且tRNA需与氨基酸形成氨酰基tRNA方可参与蛋白翻译。当tRNAs被切割为tRFs&tiRNAs时，这些修饰（比如氨酰基末端修饰3‘-aa）会全部或部分的保留下来。tiRNAs常由RNA内切酶Angiogenin切割产生，这类内切酶会在切割位点产生5‘羟基（5’-OH）末端与3’环磷酸（3‘-cP）末端。然而，tRFs&tiRNAs的检测方法常包含5’端与3‘端的接头连接步骤，需要底物小RNA 5’端为磷酸，3‘端为羟基。此外，tRFs&tiRNAs的内部修饰比如m1A, m1G与m3C会严重阻碍反转录过程。为了准确检测tRFs&tiRNAs，这些修饰必须被有效的去除。

图1. 多种tRFs&tiRNAs修饰会干扰接头连接与cDNA合成。

      Arraystar公司最新推出的rtStar™ tRF&tiRNA前处理试剂盒，可有效去除3’氨酰基末端与3‘环磷酸末端，磷酸化5’羟基末端，并移去m1A, m3C等多种甲基化修饰。处理后的RNA样本可直接应用于常规RT-PCR。该试剂盒拥有优良的技术表现，RNA回收率高达60%，适用于多类物种tRF&tiRNA研究。

产品亮点：

  •  市场上首款tRF&tiRNA前处理试剂盒，处理后RNA样本可直接应用于RT-PCR检测

  •  一次性去除多种链内或末端修饰，包括3’氨酰基末端、3‘环磷酸末端、5’羟基末端与甲基化修饰

  •  RNA回收率高达60%

  •  极大的提高了检测灵敏度、定量精确度与样本区分度 

操作流程：