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TMT同位素标记定量技术

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产品名称: TMT同位素标记定量技术

英文名称: TMT

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TMT(tandem mass tags)是由Thermo公司开发的一种体外标记技术,广泛用于差异表达蛋白质分析研究中。该技术采用2重、6重或10重同位素标签,与肽段的氨基发生共价结合反应,可实现同时对2个/6个/10个不同样品中蛋白质的定性和定量分析。

技术原理

TMT™标签由三部分组成:分子量报告基团、分子量标准化部分和反应基团,形成2种、6种或10种相对分子量相等的标签。

TMT™试剂通过反应基团能够高效地标记酶解后的肽段。在一级质谱图中,分子量标准化部分使任何一种TMT™试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中,报告基团优先断裂,释放报告离子。每个报告离子都有各自独特的分子量,并且能够在MS/MS分析中反应出所标记的多肽的样品丰度,根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息,再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。

技术流程

技术优势

1.高通量:能同时对10组样本中包含的蛋白进行鉴定及表达差异分析,可实现3样品3次重复的实验设计。
2.适用范围广:可用于各种类型生物样本,样品类型包括:胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。
3.灵敏度高:可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白。
4.高效:液质连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。

应用领域

生物标志物筛选
药物作用靶点研究
蛋白混合物或重组蛋白混合物精确定量