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一氧化氮(NO)与一氧化氮合成酶(NOS)的检测

作者:北京索莱宝科技有限公司 2023-09-26T00:00 (访问量:13487)

一一氧化氮(NO)

一氧化氮(NO)是一种极不稳定的生物自由基,分子小,结构简单,常温下为气体,微溶于水,具有脂溶性,可快速透过生物膜扩散,是生物体内重要的信号转导分子,广泛分布于生物体内各组织中,特别是神经组织。在机体免疫、循环、呼吸、消化、泌尿、生殖等系统中也起着十分重要的作用。

 

一氧化氮合成酶(NOS)及其分型

 

 

 

一氧化氮合成酶(NOS)是生物体内催化L-精氨酸合成NO的一类酶,主要存在于血管平滑肌、巨噬细胞、内皮细胞、神经细胞、肝细胞、肾小球膜细胞等各种细胞中。动物体内NOS有3种亚型,分别为神经元型NOS(nNOS)、内皮型NOS(eNOS)、损伤诱导型NOS(iNOS)。这三种亚型在不同的细胞和组织中有不同的表达模式和功能。

nNOS主要存在于神经系统中,在中枢神经系统(CNS)表达的nNOS与生物的学习、记忆等密切相关,外周神经系统(PNS)中nNOS产生的NO作为神经递质有着调节肠道蠕动、舒张血管的作用。eNOS主要存在于血管内皮细胞、肾小管内皮细胞等,血管内皮细胞eNOS产生的NO可抑制血小板聚集和黏附于血管壁,防止出现血栓,还可通过调控动脉粥样硬化相关基因的表达,阻止白细胞向血管壁的迁移和黏附,减少血管炎症,从而预防动脉粥样硬化。iNOS主要存在于与炎症反应相关的巨噬细胞、白细胞中,通常在细胞中不表达,但可被细菌脂多糖、细胞因子和其他诱导剂诱导表达,产生大量NO,引起DNA损伤和线粒体呼吸抑制等。

 

一氧化氮(NO)含量的检测

 

 

 

NO在生物体内或水溶液中极易氧化生成NO2-和NO3-,可通过检测NO2-和NO3-的含量间接得到NO含量。常见的检测方法有化学法与酶法

化学法是在酸性条件下,NO2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,计算可得样本NO含量。该法操作简便,用时较短,方便进行大批量样本检测。

酶法测定总NO含量是利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原成NO2-,再与重氮盐磺酸胺、萘基乙烯基二胺反应生成有色产物进行计算。该法检测灵敏度和准确性更高,NO含量较低的样本可用此法检测。

 

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