过碘酸-雪夫染色试剂盒(Periodic Acid-Schiff Staining Kit),即PAS染色试剂盒,也称糖原PAS染色液试剂盒(Glycogen Periodic Acid-Schiff Staining Kit),是一种使用过碘酸、雪夫(Schiff)试剂对组织中糖原、粘多糖及真菌等进行染色的试剂盒。本试剂盒适用于不同组织的石蜡切片或冰冻切片、培养的细胞、血涂片、骨髓涂片等样品。
过碘酸-雪夫染色,即PAS染色,因其主要用于多糖(polysaccharides)如糖原(glycogen)和粘性物质(mucosubstances)如黏多糖(glycosaminoglycan)、黏蛋白(mucins)、糖蛋白(glycoproteins)和糖脂(glycolipids)等物质的染色,所以也称糖原染色(Glycogen Staining)。过碘酸-雪夫染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用过碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该染色法不仅能够显示糖原还能显示中性粘液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。另外,临床诊疗中PAS染色常用于辅助淋巴细胞性白血病的诊断。
糖原是由D-葡萄糖的分支或直链组成的高分子多糖类化合物,糖原的合成与分解代谢主要发生在肝、肾和肌肉组织中。过碘酸是一种强氧化剂,能将组织或者细胞中的糖原及有关物质中的1,2-乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成两个游离醛基(-CHO),且过碘酸的特点是不再继续将醛基氧化成羧基。Schiff试剂(Schiff reagent),又称品红亚硫酸试剂,含碱性品红和亚硫酸,碱性品红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而生成无色品红。无色品红与过碘酸氧化的游离醛基结合,醌式结构恢复,生成洋红色(magenta)产物,定位于胞浆,颜色深浅与多糖含量成正比。
Samples | Color |
PAS Positive Material | Magenta |
Fungal Organisms | Magenta |
Nuclei | Blue |
Background | Light Purple |
由于单糖在固定、脱水和包埋等组织化学操作过程中被抽提掉,故一般组织标本上所能显示的糖类主要是糖原和其它多糖物质,因此如有需要可设置对照试验确定此洋红色物质是否为糖原:糖原可被淀粉酶(amylase)水解,先用淀粉酶处理后再进行PAS染色,若反应为阴性,则表明被染色的物质为糖原,反之则为其它多糖。
本试剂盒提供了过碘酸-雪夫(PAS)染色所需的过碘酸溶液、Schiff试剂、苏木素染色液和盐酸乙醇分化液等试剂,用户只需自备梯度乙醇即可完成整个染色过程。
本试剂盒操作简单方便,性能稳定,染色效果明显。本试剂盒用于小鼠小肠石蜡切片的染色效果图参考图1。
图2. 过碘酸-雪夫(PAS)染色试剂盒用于小鼠小肠石蜡切片的染色效果图。如图所示,糖原和其它多糖被染成洋红色,细胞核被苏木素染色呈蓝色。Scar=50μm。实际染色效果会因样品、检测条件的不同而略有差异,本图仅供参考。
本试剂盒C0142S和C0142M用于切片的染色,每个切片样品各使用100μl染色液,可以分别进行100次和500次染色。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0142S-1 | 过碘酸溶液 | 10ml |
C0142S-2 | Schiff试剂 | 10ml |
C0142S-3 | 苏木素染色液 | 10ml |
C0142S-4 | 盐酸乙醇分化液 | 10ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0142M-1 | 过碘酸溶液 | 50ml |
C0142M-2 | Schiff试剂 | 50ml |
C0142M-3 | 苏木素染色液 | 50ml |
C0142M-4 | 盐酸乙醇分化液 | 50ml |
— | 说明书 | 1份 |
4℃保存,一年有效。除C0142-4 盐酸乙醇分化液外,都需要避光保存。C0142-1 过碘酸溶液和C0142-2 Schiff试剂需要注意密封保存,并且如果短期内不使用,推荐-20℃保存,-20℃可以保存更长时间。C0142-3 苏木素染色液和C0142-4 盐酸乙醇分化液都可以室温保存。
注意事项:过碘酸溶液和Schiff试剂应置于4℃密封避光保存,使用时尽量避免接触过多的光照和空气。使用前,建议提前30分钟取出平衡至室温后,避光暗处使用。如果过碘酸溶液变黄或者Schiff试剂变红则不能继续使用。
染色过程中应尽量缩短蒸馏水洗涤的时间,避免糖原被水洗掉。
过碘酸溶液氧化时间不宜过短或过长,氧化时的温度以18-22℃为佳。
苏木素染色液应淡染,避免染色过深影响观察效果。
染色后的分化为选做步骤,分化后细胞核染色变浅,可根据染色需求决定是否进行分化。盐酸乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、 组织的类别和盐酸乙醇分化液的新旧程度而定。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。