透析袋的选择
(1)根据样品溶剂和确定的透析液,选择CE或RC材料的膜
(2)根据实验纯度需求选择生物技术级或标准级的透析袋
(3)正确选择扁平宽度
透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15cm的透析袋。
(4)根据杂质和要保留的物质的分子量选择一定截留分子量的透析袋。
a.透析袋的截留分子量是指对该分子量的物质的截留率能达到90-95%,如10000截留分子量的透析袋对于10000的物质,截留率是90-95%(5~10%会出去)
b.对于杂质,若想去除的干净,需选择100倍的截留分子量的透析袋,如杂质是1000,那选择10万截留分子量的透析袋才能将杂质完全去除;但同时考虑要保留的物质的分子量;所以,要想得到纯度较高的物质,就尽量选择大ー点的截留分子量,产品收率会降低;若想获得较高的产品收率就选择要和保留的产品的分子量相同的透析袋。
注意事项
1.对于预型和甘油处理的透析袋,使用前一定要用去离子水完全冲洗掉防腐剂和甘油后使用
2.透析袋不能在纯水中长期储存,会长菌,用0.05%NaN₃溶液储存
3.样品按推荐的单位长度容量加样,不可多加,样品浓度不可太大,否则容易导致膜涨破
4.样品和透析液体积比一般是150-500
5.对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换
6.透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃,再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃
7.在适当的储存情条件下,保质期为两年
| 生物技术级CE膜 | 生物技术级RC膜 | 标准级RC膜 | 普通干型透析袋 |
可耐受pH范围 | 2-9 | 2-12 | 2-12 | 5-9 |
可耐受温度 | 4-37℃ | 4-60℃ | 4-60℃ | 可煮沸,可高压 灭菌 |
可耐受溶剂 | 可耐受弱酸碱和浓度较低的强酸碱及低浓度的醇溶液;强有机溶剂会导致膜孔径变化 | 可耐受高浓度的弱酸碱,低浓度的强酸碱,大多数醇和温和有机溶剂;强有机溶剂可能导致膜孔径变化 | 可耐受高浓度的弱酸碱,低浓度的强酸碱,大多数醇和温和有机溶剂,包括DMSO;长时间接触强有机溶剂会造成膜损坏 | 与很多盐兼容,比如CaC2、(NH4)2SO4还可与分子生物学和酶学常用的水溶剂和有机溶剂兼容,如异丙醇、乙醇、丙酮 |
包装 | 湿型(0.05%NaN₃) | 干型 | 有湿型(0.05%NaN₃)和干型 | 干型 |
污染物水平 | 超纯 | 超纯 | 极低水平的重金属杂质 | 硫化物<0.3%重 金属<50ppm |
预处理 | 无需预处理,只需用蒸馏水清洗掉NaN3即可使用 | 无需预处理,只需用蒸馏水预湿即可使用 | 无需预处理,只需用蒸馏水清洗掉NaN₃或甘油即可使用 | 需一定的预处理煮沸等操作 |
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