抗体的可重现性在科学研究中的重要性
根据《Nature》的统计数据,超过70%的研究人员无法重现其他人的实验结果;超过一半的人无法重现他们自己之前的实验结果。 导致重现性差的主要因素之一是使用的试剂。 尤其是在公开数据中抗体试剂的可重复性具有重要的角色。所有义翘神州的抗体都是自主研发和生产的,所有的验证结果也是公开的。 为了向客户提供更可靠的抗体,我们投入了大量的时间和资金进行抗体质量验证,并建立了严格的 QC 体系和各种分析方法。
完全验证的免疫组化 (IHC) 抗体
下面以 IHC 抗体为例,义翘神州完整的抗体验证步骤如下所示。
完全验证 | ||||||||
抗原设计 | → | 多个实验对照 | → | 抗原阻断 | → | 多组织验证 | → | 批次间稳定 |
抗原设计
完全自主生产• 500+ 的研发团队
• 10 年高品质试剂研发经验
• 拥有 6000+ 重组蛋白
• 五大重组蛋白生产平台
85% 真核表达
• 更接近天然结构
• 更好的生物活性
• 低内毒素:<0.1 EU / μg by LAL
• 高纯度:>95% by SDS-PAGE
多个实验对照
A: 空白对照: 不含一抗,确保二抗无法非特异性地结合某些细胞成分。
B: 阴性对照: 组织中不表达目标蛋白。 因此,如果您在阴性对照中看到染色,则表明这种染色是非特异性的。
C: 阳性对照: 已知表达目标蛋白的细胞系或组织。 如果阳性对照出现阴性结果,说明实验步骤有误。
抗原阻断
抗原阻断是指基于预先孵育一抗与免疫原以确认抗体特异性的方法。 如果抗原封闭后组织未显示染色,则证明该抗体特异性地识别您感兴趣的靶点。 但也有例外的情况,例如,当免疫原是整个蛋白时,抗体加蛋白的混合物可能会导致更强的非特异性染色,但目前尚不清楚该机制。
多组织验证
您的目标蛋白可能在不同的组织中表达,而通常在不同组织中,抗体染色结果并不完全相同。
您能用抗体检测您想要的组织中的目标蛋白吗? 这直接影响您的实验结果。
抗体供应商提供的测试组织可能与您想要研究的样本不一样。
因此,
如果供应商验证更多的组织类型和样品,
您可以参考更多信息,
而且
您的实验更有可能获得成功。
批次间稳定
由于免疫动物存在不可避免的差异,不同批次的多克隆抗体在IHC染色中可能并不完全相同。 尽管单克隆抗体由相同的B淋巴细胞分泌,但细胞培养条件和抗体纯化方法的改变可能导致抗体性质的变化。 因此,无论是多克隆抗体还是单克隆抗体,批次间抗体的稳定性都非常重要。