色谱法是一种分离方法,是利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。
色谱法根据物质的分离机制可分为离子交换色谱法、吸附色谱法、分配色谱法、凝胶色谱法、亲和色谱法等;根据流动相的不同又可以分为气相色谱法和液相色谱法。目前常见的色谱法有气相色谱法、高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法和柱色谱法等。
柱色谱法是最原始的色谱方法,被广泛应用于混合物的分离,包括有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。薄层色谱法因其成本低廉操作简单而应用广泛,常被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等。气相色谱法和高效液相色谱法是机械化程度很高的色谱方法,气相色谱被广泛应用于小分子量复杂组分物质的定量分析。高效液相色谱法是目前应用最广泛的色谱方法,几乎包括定量定性分析的各个领域。
气相色谱系统由气源、色谱柱和柱箱、检测器和记录器等部分组成。气相色谱的色谱柱比较细长,根据结构可以分为填充柱和毛细管柱,填充柱比较短粗,外壳材质一般为不锈钢,内部填充固定相填料;毛细管柱一般由玻璃或石英组成,内径不超过0.5 mm,长度在数十米到一百米之间,柱内填充填料。
高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成。由于液体流动相粘度比较高,为了减低柱压,高效液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也比气相色谱柱要短。
气相和高效液相色谱系统中的色谱柱内部可填充填料,纯化分离不同的物质需要选择不同的填料/介质。
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